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伴隨著生命科學(xué)、醫(yī)藥學(xué)及環(huán)境、食品安全等領(lǐng)域的強(qiáng)勁需求與發(fā)展，已很成熟的HPLC技術(shù)獲得了新的推動(dòng)力，面臨著新的挑戰(zhàn)和發(fā)展機(jī)遇。這些新的需求可歸納為：更高的分離效率、更快的分離速度、更好的化學(xué)穩(wěn)定性、更大的峰容量和更適宜的分離模式。此外，針對痕量樣品的分離分析，對檢測靈敏度也提出了更高的需求。面對這些挑戰(zhàn)與需求，作為色譜儀和色譜技術(shù)核心的色譜柱，近年來發(fā)展迅速，取得了更顯著的發(fā)展。近年來，色譜技術(shù)的新進(jìn)展主要包括：細(xì)粒徑填料及色譜柱、超純硅膠基質(zhì)及高化學(xué)穩(wěn)定性填料、整體柱技術(shù)、親水作用色譜柱等。
針對、快速、高通量的要求，細(xì)粒徑填料，特別是亞2微米尺度硅膠基質(zhì)填料取得了長足的發(fā)展，并直接催生了超也是超高壓色譜系統(tǒng)的出現(xiàn)。早在2005年Ｗaters公司向市場推出了ＵＰＬＣ系統(tǒng)，所使用的1.7?m的雜化型填料；嗣后，日本分光、安捷倫、珀金埃爾默、島津、戴安等公司也相繼推出了相應(yīng)的超效或超快液相系統(tǒng)。這些系統(tǒng)均使用了亞2微米填料或2微米填料填裝的柱子。但是，根據(jù)色譜動(dòng)力學(xué)理論可知，柱子所需壓力將隨粒徑減小呈平方增長，此外，由于*線速度與粒徑成反比，此時(shí)，若要得到*流速，還必須提高流速。綜合考慮兩個(gè)因素，柱壓降將與粒徑的三次方成反比。因此，為取得高柱效就必須大幅提高流動(dòng)相的驅(qū)動(dòng)壓力。
傳統(tǒng)的以硅膠為基質(zhì)的ＨＰＬＣ填料，因其本身性質(zhì)的局限以及殘余硅羥基和雜質(zhì)金屬離子的影響，存在對極性溶質(zhì)的非特異性吸附和化學(xué)穩(wěn)定性較差的問題。此問題，可從三方面入手加以解決：一是采用超純硅膠基球，二是采用特殊的鍵合試劑和反應(yīng)控制方法，三是發(fā)展聚合基質(zhì)填料。目前，這一問題已經(jīng)得到了較好的解決。
整體柱（monolithic column）是用原位聚合和類似澆鑄的方法制備的整體、連續(xù)的柱體組裝的色譜柱。整體柱具有雙孔結(jié)構(gòu)，即同時(shí)具有微米級的大孔和納米級的小孔，因此，柱子具有較高的柱效但柱壓卻很低，Ｈ-u曲線也較平坦。此外，由于基質(zhì)的純度很高，使得這種整體柱的化學(xué)穩(wěn)定性亦很好。因此，人們普遍對其給予厚望。但是，整體柱柱間重現(xiàn)性問題限制了其更廣泛的應(yīng)用，是一個(gè)亟待解決的難題。
生物醫(yī)藥色譜中往往需要面對強(qiáng)極性化合物的分離問題，但常用的反相色譜對強(qiáng)極性化合物如糖及糖綴合物、糖肽等的分離幾乎無能為力，故而迫切需要發(fā)展新的色譜分離模式。親水作用色譜（ＨＩＬＩＣ）應(yīng)運(yùn)而生。此外，石墨化碳柱因其特殊的選擇性而適用于強(qiáng)極性物質(zhì)的分離。混合模式柱或表面嵌入極性基團(tuán)的方法也可以使其可同時(shí)分離極性和非極性物質(zhì)，在用途上和ＨＩＬＩＣ具有類似性。
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